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RNA INTERFERENZ DURCH TMIDGE® VEKTOREN

enero 21, 2021

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Sinopsis de RNA INTERFERENZ DURCH TMIDGE® VEKTOREN

ISBN: 9783668253742 Géneros: PSAK Sinópsis: Bachelorarbeit aus dem Jahr 2010 im Fachbereich Biologie Genetik Gentechnologie Note 13 Technische Universitat Berlin Biotechnologie Sprache Deutsch Abstract Die RNA Interferenz durch kurze nichtkodierende RNA Sequenzen siRNA erlaubt es der Forschung neue Therapiemoglichkeiten fur die Behandlung von Krankheiten die ihre Ursache in fehlerhaften Regulationsmechanismen der Genexpression haben zu entwickeln Das patentierte minimalistische Design der MIDGE® Vektoren ermoglicht eine siRNA Expression mit Hilfe von kleinen Expressionskassetten die innerhalb der Zelle transient und ohne großen Einfluss auf weitere Signalwege eine gezielte Inhibierung der Genexpression bewirken konnen Um bestehende Patentanspruche zu umgehen und einfachere effizientere RNAi Vektoren zur Verfugung stellen zu konnen werden modifizierte TMIDGE® hergestellt und getestet Hierfur wurde mit synthetischen Methoden ein nichtlinearer DNA Vektor hergestellt welcher durch Transfektion in Saugerzellen eingebracht wurde Die Voraussetzung fur eine erfolgreiche Herstellung der Vektoren und Prozessierung innerhalb der Zelle stellt hohe Anspruche an die Reinheit der genutzten Oligodesoxynukleotide welche zuerst erfolgreich optimiert und validiert wurden Die Untersuchung der GenKnockdownEigenschaften erfolgte in CHOK1 Saugerzellen aus Hamsterovarien mit einem dualen LuciferaseReportergen Assay in Hinsicht auf den maximalen GenKnockdown sowie die Effizienz der neu entwickelten TMIDGE® Vektoren Hierbei zeigte sich ein deutlich verminderter KnockdownEffekt im Vergleich zu linearen MIDGE® Vektoren oder weit verbreiteten Plasmidbasierten Vektoren Dies fuhrte zur weiteren Entwicklung neuartiger Einzelstrangvektoren die nach erfolgreicher Synthese ebenfalls im Zellversuch getestet wurden Der GenKnockdown blieb hierbei ebenfalls hinter linearen MIDGE® Vektoren zuruck Die Ursachen fur den stark verminderten KnockdownEf
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Categorías:

Ciencias

Biología

Genética

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